本发明公开了一种基于双标记扩增的血浆循环甲基化DNA
电化学检测方法,属于甲基化DNA检测技术领域。本发明使用不同标记(地高辛,生物素)的甲基化特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)鉴别亚硫酸氢盐修饰的基因组样品中的甲基化DNA而不是非甲基化等位基因;利用聚合酶的扩增能力,产生大量具有地高辛和生物素双标记的双链扩增子;通过修饰在金电极表面的地高辛抗体捕获这些双链扩增子;然后通过生物素‑亲和素结合作用捕获辣根过氧化物酶缀合的抗生物素蛋白(Avidin‑HRP),利用酶的催化过程产生电化学信号。该方法具有良好的灵敏度,能检测5pg的甲基化DNA分子,同时具有良好的特异性,能够在有大量非甲基化DNA干扰下检测出1%的甲基化DNA。
声明:
“基于双标记扩增的血浆循环甲基化DNA电化学检测方法及试剂盒” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究,如用于商业用途,请联系该技术所有人。
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