本发明公开了一种化学发光成像技术检测单核苷酸多态性的方法,是通过以下步骤实现的:(1)连接酶扩增:准确加入G12C突变型k-ras基因与探针1、探针2、10×连接酶Ampligase反应缓冲液和TE缓冲液于离心管中,进行扩增;(2)将链霉亲和素磁性微球用HEPES缓冲溶液洗两次,加入上述离心管中,室温振荡孵育,磁分离后,弃去上清液,用HEPES缓冲液清洗;(3)上述离心管分别加入HEPES缓冲溶液和氯化血红素,室温振荡反应,得到磁性微球-DNA复合物;(4)将磁性微球-DNA复合物用HEPES缓冲溶液清洗,磁分离后,各加入鲁米诺、H2O2于全白96孔板中,采用美国UVP公司的化学发光成像分析仪测定其化学发光图像及发光强度;实现了对单核苷酸多态性的高灵敏、高选择性检测。
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