本发明公开了一种单克隆抗体蛋白细胞培养液澄清的预处理方法，属于蛋白质纯化制备领域。
背景技术：
单克隆抗体(monoclonalantibody,mab)是一类重要的生物技术药物，在现代生物检测领域和医疗领域起着越来越重要的作用。现有技术中，单克隆抗体通常由中国仓鼠卵巢细胞(chinesehamsterovary，cho)表达产生，随着上游高表达细胞株的构建、基因改造、发酵条件的不断优化，cho细胞的单克隆抗体表达量已经达到30g/l以上，培养规模也逐步扩大，伴随着生物量以及杂质量的显著提高，上游产能的提升给下游分离纯化过程带来极大的压力。而高效的细胞回收液澄清预处理将大大减轻后续抗体纯化的压力，对于缩短工艺流程、提高经济性具有决定性的作用。由此可见，评价细胞回收液澄清效果的主要标准已经逐渐转变为不单单能有效地去除哺乳动物细胞、细胞碎片，更重要是在保证最终抗体蛋白回收率的同时，尽可能多地去除宿主细胞蛋白(hostcellprotein,hcp)、宿主残留dna、高分子量蛋白聚集体等污染物。
传统单克隆抗体分离纯化通常包括蛋白a亲和层析纯化、阴阳离子交换树脂纯化、疏水性作用树脂纯化等3-4步单元操作，工艺流程长、产品产率较低，导致单克隆抗体产品成本居高不下。因此如何缩短工艺流程、降低生产成本直接决定了在当前上游产能大大提升状况下，下游抗体分离纯化的主要研究方向。离心和切向流过滤常被应用于工业中去除细胞，最近几年深层过滤的应用也越来越广泛。絮凝剂用来增强细胞、杂质的去除和离心的效果也越来越受到广泛的关注。沉淀法因具有操作简单、省时省力、回收率高等特点在抗体分离纯化中应用广泛。沉淀技术的原理是利用不同蛋白疏水性的差异，通过调节盐浓度沉淀相应的蛋白，达到分离纯化的目的。辛酸是一种饱和脂肪酸，促进酸性蛋白发生沉淀，等电点较高的单克隆抗体因具有足够的电荷以中和辛酸的疏水作用，得以保留在上清液中，但是该方法会增加浊度和黏度，不利于分离上清液。所以本领域亟需一种更为简单有效的沉淀法用于单克隆抗体细胞培养液的澄清以增加后续分离纯化的效率。因此，本发明的目的就是提供一种操作便捷、快速高效地基于脂肪酸沉淀的单克隆抗体细胞培养液澄清的预处理方法。
技术实现要素：
为实现上述发明目的，本发明提供了一种使细胞培养液澄清的预处理方法，以去除各种宿主细胞杂质，所述方法包括以下步骤：
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声明：
“浮选菱镁矿矿石的药剂制度的制作方法” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究，如用于商业用途，请联系该技术所有人。
我是此专利(论文)的发明人(作者)
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编辑：中冶有色网
来源：鞍山钢铁学院
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2025年05月23日 ~ 25日 
