本发明公开了一种玉米AGPase磷酸化鉴定方法,涉及生物化学与分子生物学领域,步骤为:AGPase亚基蛋白Sh2和Bt2抗体的制备,AGPase亚基Sh2和Bt2抗体的特异性验证,授粉后15天、20天和27天玉米胚乳蛋白的提取,授粉后15天、20天和27天玉米胚乳磷酸化蛋白的富集,授粉后15天、20天和27天玉米籽粒磷酸化蛋白的检测和验证;本发明在制备好抗体后,结合Phos‑tag技术具有快速确定AGPase酶是否发生磷酸化的优势,并且不需要进行质谱,因而成本低。并且此方法只要有特异的相应蛋白抗体,具有推广到鉴定任意一种蛋白磷酸化的鉴定上,因此具有蛋白质磷酸化鉴定的广泛应用。
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