本发明公开了一种使用家蚕制备镇痛活性多肽的方法,属于基因工程领域。所述制备方法如下:根据家蚕核型多角体病毒(BmNPV)密码子使用频率优化芋螺毒素ω-MVIIA基因序列,经化学合成后连入供体质粒pFastBacDual,再引入绿色荧光蛋白(EGFP)基因,构建重组供体质粒pFBD-MVIIA/EGFP。使用Bac-to-Bac方法将MVIIA/EGFP转座到BmNPV,形成重组病毒vBmMVIIA/EGFP。将重组病毒DNA转染至家蚕细胞,获得BV粒子,借助绿色荧光测定BV粒子滴度后,以200?pfu的BV粒子注射家蚕,感染5天后,收获家蚕血液。通过小鼠醋酸扭体试验证实,表达芋螺毒素ω-MVIIA的受感染家蚕的血液具有显著的镇痛活性,平均扭体次数仅3.55次,明显高于注射生理盐水的对照组(37.30次)。本发明为表达具有镇痛活性的芋螺毒素ω-MVIIA提供了新的方法,具有潜在的应用价值。
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