本发明属于基因工程技术领域。本发明以谷胱甘肽为亲和手臂,以1,4-丁二醇二缩水甘油醚为活化交联剂。通过对层析介质的活化、洗涤、谷胱甘肽偶联反应、反应中止和洗涤,制备了GST蛋白亲和层析介质。对制备条件和工艺进行了优化。用制备好的GST蛋白亲和层析介质进行分离含有GST蛋白的特异性吸附和分离纯化性能的测试,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析和蛋白质定量分析方法分析GST蛋白亲和层析介质纯化蛋白质的纯度和吸附容量。结果表明用本发明方法制得的亲和介质具有很高的特异性和纯化效率,其亲和吸附能力远高于用环氧氯丙烷为活化剂制备的亲和介质,与相应国外商品化介质的性能相近,具有高效、价廉的特点,能够作为亲和层析介质用于GST及GST融合蛋白质的分离纯化,适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究,在生物工程领域具有良好的实用前景。
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“谷胱甘肽-S-转移酶(GST)蛋白亲和层析介质的制备方法及其应用” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究,如用于商业用途,请联系该技术所有人。
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