一种基于核酸外切酶和核酸探针的电化学检测特定单链DNA浓度的方法,属于分析化学技术领域。本发明设计合成了两种发夹型探针P1和P2。首先,用1,6?己二硫醇HDT将金纳米颗粒修饰金电极,制备AuNPs?HDT?Au电极,然后将P1探针修饰到电极上。以特定单链目标DNA作待检测物,在没有目标DNA存在时,P1和P2探针能够共存;在目标DNA、P2探针和核酸外切酶ExoⅢ存在时,目标DNA能触发两个独立的反应循环。最后在血红素存在时,保留在电极表面的P1探针的G?四链体序列和血红素相互作用,产生强烈的电信号,用差分脉冲伏安法对目标DNA进行检测,峰电流信号与目标DNA浓度之间在一定浓度范围内呈相关性,实现对目标DNA浓度的检测。本发明方法具有灵敏度高、特异性强的优点。
本发明涉及电化学分析测试技术领域。一种检测罗丹明B的电化学方法,以二氧化硅柱撑α-磷酸锆修饰玻碳电极为工作电极,饱和甘汞电极作为参比电极,铂片电极作为辅助电极,组成三电极体系进行检测。本发明的有益效果是,利用二氧化硅柱撑α-磷酸锆均匀有序的层状结构,其具有大的比表面积,优异的吸附性能,结构中的磷酸根阴离子与阳离子型色素罗丹明B可产生静电吸附,而对于阴离子型违禁食品添加剂则产生静电排斥的作用,可以在色素混合液中选择性检测罗丹明B,与其他检测方法相比,其简单快速、易操作,用于实际样品蜜饯及辣椒面中罗丹明B的测定,本测试方法具有较高的灵敏度、较好的选择性。
本发明涉及一种基于石墨烯/纳米金改性电极(Gr-Au/GC)的无酶电化学传感器,并用于检测葡萄糖含量。本发明采用氯金酸(HAuCl4)和石墨烯(Gr)来制备改性电极,制备出一种对葡萄糖的氧化具有非常高活性的改性电极,改性电极中高度分散的纳米颗粒为电催化反应提供大的表面积,提高了检测的灵敏度、加快了电子转移速率、增强了对葡萄糖的分析性能。本发明涉及的电化学传感器对葡萄糖的检测具有高的灵敏度,低的检测限,宽的检测范围。
本发明公开了一种有机磷农药的电化学检测方法。所述的检测方法为:首先制备石墨烯‐壳聚糖‐对硫磷复合物修饰的电化学传感器,然后以K3[Fe(CN)6]为探针,基于乙酰胆碱酯酶能与有机磷农药发生强烈结合作用的原理,进行差分脉冲伏安(DPV)扫描,记录响应电流,通过相关数据的分析与推导,即可得到待测样品中相应有机磷农药的浓度。本发明提供的检测方法对有机磷农药的检测限在0.012~0.23ng/mL之间,线性范围为1~1500ng/mL。本发明具有如下的有益效果:与其他利用酶抑制法进行有机磷农药快速检测的方法相比,本发明提供的检测方法无需进行酶促反应,因此大大节省了检测时间,同时也避免了因为采用不同来源的酶所导致检测结果重复性差的问题。
本发明属于电化学检测领域,涉及一种检测氮掺杂碳量子点的电化学发光方法。本发明中,基于三丙胺(TPA)作为羧基化三联吡啶钌(Ru(dcbpy)32+)的共反应物,利用氮掺杂碳量子点(NCQDs)对Ru(dcbpy)32+/TPA体系的猝灭效果实现对NCQDs的检测。NCQDs对Ru(dcbpy)32+/TPA的ECL信号的猝灭行为主要归因于Ru(dcbpy)32+/NCQDs的相互作用,而不是TPA/NCQDs。具体为,当Ru(dcbpy)32+与NCQDs共存时,Ru(dcbpy)32+中的羧基与NCQDs表面的含氧、含氮基团充分接触,形成分子间氢键,吸收了体系的能量,减弱了Ru(dcbpy)32+的ECL信号。在此基础上,发展了用于NCQDs检测的猝灭型ECL传感器,该传感器的线性范围为0.002~0.2mg/mL‑1,检出限为0.001mg/mL,成功实现了NCQDs的高性能分析。该方法具有快速、简单、灵敏的特点。
本发明是一种p53蛋白的电子介体型酶促电化学免疫检测方法,具体步骤包括:免疫分子固定化活性界面制备;电子介体型酶促电化学免疫分析系统构建与优化;p53蛋白定量检测。经静电纺丝、电聚合硫堇获得PA6-MWCNTs-PTH免疫分子固定化活性界面,在PA6-MWCNTs-PTH界面上经三明治免疫反应构建电子介体型酶促电化学免疫分析系统并进行相关参数优化,应用所构建的免疫分析系统定量检测p53蛋白。本发明所提供的检测方法具有高灵敏度、高选择性、高稳定性、可再生、宽线性范围及低检出限等特点。
基于雄激素受体识别元件和G‑四链体杂交链式放大反应检测雄激素受体的电化学方法,属于分析化学和临床诊断技术领域。本发明利用雄激素受体(AR)对雄激素受体识别元件(ARE)的保护作用,当AR存在时与具有特定序列的双链DNA即ARE结合,使其免受限制性内切酶NspI的切割,同时借助杂交链式放大反应通过序列互补将大量G‑四链体结构聚集到固定在电极表面的含有ARE的DNA探针上。最后利用电极表面结合的具有氧化还原活性的G‑四链体‑血红素复合物与AR浓度呈正相关,利用差分脉冲伏安法(DPV)测定峰电流信号,通过电流值与AR浓度间的线性关系实现对AR的定量分析。该方法具有灵敏度高、专一性好等优点,并适用于对人血清等临床样本中AR浓度的定量分析。
硅烷交联壳聚糖膜基的流动注射化学发光免疫检测池:将该传感器与化学发光流动池结合,制备流动注射化学发光免疫检测池;化学发光流动池是由上层的塑料板、下层透明板和硅橡胶垫圈构成;在上层的塑料板开有二个通道,作为液体传输的进口和出口;在其内侧刻有一凹槽,用来嵌入免疫传感器;下层板为透光性较好玻璃或有机玻璃板,并直接放置在光电倍增管上方;中间采用硅橡胶垫圈形成反应池,免疫反应和发光检测均在此反应池中发生;免疫传感器的构造为在硅烷化载体表面制备壳聚糖膜,固定抗原分子,构造新型免疫传感器。本发明分析速度更快速,适用于临床在线快速检测;重现性好。
本发明涉及一种基于磁性微粒的自动化牛细胞因子化学发光免疫检测方法。本发明利用夹心免疫分析法,以磁珠为抗体的固定载体,联合流动注射,应用于化学发光分析,构建了一个高灵敏的自动化化学发光免疫检测牛细胞因子的方法。首先将带羧基的磁珠进行活化,再将抗体共价连接于磁珠表面,封闭剩余活性位点后即制得免疫传感器。当应用于牛细胞因子的检测时,免疫传感器与抗原、辣根过氧化酶标记的抗体混合通入免疫微反应器,在线温育形成夹心复合物后通入化学发光底物,随后立即进行发光信号的采集,从而实现快速检测。本发明具有分析时间短,操作简单,特异性高,灵敏度高等特点,可用于牛细胞因子的定量检测及其免疫机理的研究。
本发明公开了一种检测氧化石墨烯的电化学发光方法,首先在电化学发光池中加入PBS缓冲液,随后在该溶液中注射鲁米诺溶液,可以得到一个很强的鲁米诺ECL强度。最后,不同浓度的GO加入到含有鲁米诺的PBS缓冲溶液中时,得到了鲁米诺ECL不同程度的淬灭。基于GO对鲁米诺电化学发光的抑制效应,鲁米诺的电化学发光信号降低;然后用于GO的简单、快速、灵敏检测。在0.08~800μg/mL浓度区间内,GO浓度的对数与△IECL强度值呈现良好的线性关系,检出限可达0.0267μg/mL。且该方法所需样品易于合成,检测简单、时间短,且灵敏度较高,可望应用于实际样品中GO的检测分析。
双信号超级三明治电化学传感器检测基因甲基化的方法,包括步骤:在MoS2纳米层表面原位合成Au NPs,形成Au NPs@MoS2复合纳米材料;标记两种电活性物质的探针碱基互补配对,形成双信号串联体探针;“探针‑甲基化肿瘤抑制基因‑双信号串联体探针”超级三明治结构的形成;构建电化学传感器,分析肿瘤抑制基因的甲基化状态。本发明的双信号超级三明治电化学传感器检测基因甲基化的方法,利用复合纳米材料、双信号导出技术、超级三明治放大策略构建了灵敏高并且快速方便的电化学传感体系,不仅可以识别不同甲基化程度的肿瘤抑制基因,而且可应用于完全甲基化的肿瘤抑制基因的高灵敏检测,可以满足临床样品检测的灵敏性要求。
本发明提供了一种检测2,4,6-三硝基苯酚的荧光化学传感器及其制备方法,属于功能高分子材料制备和化学分析技术领域。该荧光化学传感器具有如下所示的化学结构。所述荧光化学传感器的制备方法,包括如下步骤:步骤一,在缚酸剂存在的条件下,利用六氯环三膦腈与姜黄素在有机溶剂中发生缩聚反应,得溶液;步骤二,分离溶液中的固体产物,洗涤并干燥,得荧光化学传感器。本发明的基于环交联型聚膦腈的荧光化学传感器制备过程简单温和,具有优异的热稳定性、化学稳定性和荧光特性,可实现液相中2,4,6-三硝基苯酚的特异性识别和检测,且灵敏度高,适用于痕量爆炸物检测及环境监测领域,有利于实现工业化生产。
一种检测金黄色葡萄球菌的电化学方法,属于分析化学及环境污染检测技术领域。本发明采用具有特殊切割位点的切刻内切酶Nb.bpu10I和强链置换效应的Bsm DNA聚合酶通过链置换扩增反应获得大量单链DNA扩增序列。将扩增序列加入到电极系统中,与MB序列完全互补,打开三链结构,使G四链体电化学信号释放。通过电化学信号与金黄色葡萄球菌数量的关联,实现了对湖水中的金黄色葡萄球菌的数量检测。本发明方法具有回收率高,灵敏度高,特异性强等优点。
本发明涉及lncRNA MEG3双重检测电化学基因传感器,其制备方法与应用,基于酶辅助目标循环信号放大与DNA链杂交(HCR)信号增强策略,采用二硫化钨/树枝状金纳米复合材料修饰电极以及碱基特异性互补配对,通过双信号探针实现对双组分的超灵敏定量分析。本发明的电化学基因传感器检测双组分的线性范围为1fM~100pM,检测限低,分别为0.25fM和0.3fM;具有优异的灵敏度、重复性、特异性和稳定性,并且成本低,因而在生化研究和临床分析等领域具有较大的应用价值。
一种河蟹养殖水质关键化学性指标检测同步供水装置,包括吸水泵、单向阀、进水总管、过滤器、二通阀、氨氮分析仪、亚硝酸盐分析仪、高锰酸盐分析仪、总磷分析仪和总氮分析仪,每个待检测池塘都由吸水泵和单向阀向进水总管供水,所有分析仪分别通过过滤器和二通阀与进水总管相连通。它既能同步向每一台化学指标分析仪提供同质的真实待检测水,单向阀的设置杜绝了各待检池塘水体的相互混和污染,过滤器的设置能有效滤除水中的物理杂质,从而保证同时能对待检测池塘的水质进行多项化学指标的同步检测,并能保证水质检测的客观真实性,它是河蟹养殖物联网在线监测系统中水质化学性指标同步检测设备中关键部分。
本发明属于生物技术领域,特别涉及一种三通道电化学发光传感器及其在细胞检测上的应用,所述传感器包括以聚苯胺为基底的工作电极、Ag/AgCl电极和电化学发光分析仪;其中,三支工作电极和三支Ag/AgCl电极分别插入三个独立的电解池中,并以并联的方式与电化学发光分析仪连接;其中,一支工作电极修饰鲁米诺功能化的金纳米颗粒,提供参比信号,同时对另外两支工作电极上的细胞分别进行Ru(bpy)32+和g‑C3N4标记,提供两个检测信号;最后,根据检测信号和参比信号之间的比值对细胞进行测定;本发明在一次电位循环扫描过程中,获得三个独立的电化学发光信号,同时提供了两种检测目标细胞的方法。本发明的电致化学发光三通道设计简单,提高了检测通量,操作简便,实用性强。
本发明公开了一种基于发光检测用的电化学流通池及其系统,其中流通池主要包括固定电极芯片的基底、带有电解槽腔的基块以及连接并锁紧基底和基块的锁紧部件。其中带有电解槽腔的基块上加工有提供液体进出电解槽腔的管路、分别与电极芯片上三电极引出线接触的三个导电弹片,以及既保证电化学发光信号进入光强检测器同时起到密封作用的光学窗体。整个检测系统还包括辅助的提供流通动力的蠕动泵、流通管路系统以及信号接收及处理系统。该流通式电化学发光检测系统体积小巧、轻便,可方便地集成于便携式小型电化学发光检测仪,其可直接用于电化学发光检测,也可用于电化学发光免疫分析或电化学发光核酸杂交分析,还可用于生化实验室或医院检验科等。
血红蛋白芯片的制备及其电化学检测方法涉及血红蛋白临床检测芯片的制备,尤其是结合电化学分析技术建立了血液中血红蛋白含量的测定方法。制备方法为:1)印刷碳电极制备:2)普鲁士蓝纳米粒子的制备与修饰:3).将制得的纳米粒子蒸发烘干后,溶于0.1M PH 7.0磷酸盐缓冲溶液,并喷洒于印刷碳电极表面,冰箱中晾干备用。电化学检测方法为:1)测试条件的优化,A)还原态血红蛋白标准溶液制备:B)测量电位选择:C)缓冲溶液的PH值:2)标准曲线绘制:3)标准曲线校正。本发明利用电化学技术简便、易行、价廉的特点,结合纳米粒子的信号放大作用,建立了血液中血红蛋白含量检测的电化学方法,其操作简单、成本较低、分析速度快。
本发明涉及一种磷脂IgG抗体的化学发光定量检测试剂盒,包括如下试剂:含有5~100ng/mL的生物素标记的心磷脂抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰乙醇胺抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰肌醇抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰丝氨酸抗原、1~10μg/mL的生物素标记的β2糖蛋白I抗原的混合溶液;浓度为10~1000ng/mL的碱性磷酸酶标记的鼠抗人IgG单克隆抗体溶液;浓度为0.1~1 mg/mL的链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液。本试剂盒的灵敏度高、精密度高、线性范围宽、稳定性好、有效期长,环保性能大大提高。
本发明涉及一种磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒,包括如下试剂:含有5~100ng/mL的生物素标记的心磷脂抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰乙醇胺抗原、为5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰肌醇抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰丝氨酸抗原的混合溶液;浓度为10~1000ng/mL的碱性磷酸酶标记的鼠抗人IgM单克隆抗体溶液;浓度为0.1~1 mg/mL的链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液。本试剂盒的灵敏度高、精密度高、线性范围宽、稳定性好、有效期长,环保性能大大提高。
本发明涉及一种血清类胰蛋白酶的化学发光定量检测试剂盒,包括如下试剂:浓度为0.1~1 mg/mL的链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液;浓度为0.5~5μg/mL的生物素标记的鼠抗人类胰蛋白酶抗体溶液;浓度为0.2~1μg/mL的碱性磷酸酶标记的鼠抗人类胰蛋白酶抗体溶液。本发明通过对试剂盒的组成及各试剂配置工艺等与血清学抗体反应原理相关的各种关键技术的优化,使得本试剂盒的灵敏度和准确性高,最低检测限低(0.54μg/L),精密度高(日内变异系数为2.61~7%,日间变异系数为3.39~8.7%),干扰小,稳定性高。
本发明涉及一种食物过敏原的化学发光定量检测试剂盒,包括如下试剂:磁分离试剂:标记有食物过敏原的磁微粒悬浮液,所述的标记有食物过敏原的磁微粒的浓度为0.1~1.0mg/ml;酶标试剂:含碱性磷酸酶标记的抗人IgE抗体溶液,所述的含碱性磷酸酶标记的抗人IgE抗体的浓度为0.5~1μg/ml。本发明通过采用标记有食物过敏原的磁微粒悬浮液和含碱性磷酸酶标记的抗人IgE抗体溶液制成的试剂盒,使得灵敏度达到0.008IU/ml,并且该试剂盒与其他免疫球蛋白的交叉反应率均小于0.04%,准确性好、精密度高,样本无需预稀释,操作简单省时,检测范围宽。
本发明涉及一种吸入过敏原的化学发光定量检测试剂盒,包括如下试剂:磁分离试剂:标记有吸入过敏原的磁微粒悬浮液,所述的标记有吸入过敏原的磁微粒的浓度为0.1~1.0mg/ml;酶标试剂:含碱性磷酸酶标记的抗人IgE抗体溶液,所述的含碱性磷酸酶标记的抗人IgE抗体的浓度为0.5~1μg/ml。本发明通过采用标记有吸入过敏原的磁微粒悬浮液和含碱性磷酸酶标记的抗人IgE抗体溶液制成的试剂盒,使得灵敏度达到0.008IU/ml,并且该试剂盒与其他免疫球蛋白的交叉反应率均小于0.04%,准确性好、精密度高,样本无需预稀释,操作简单省时,检测范围宽。
本发明提供了一种检测甲基对硫磷(MP)的化学发光免疫检测试剂盒,属于免疫学检测领域。本发明的试剂盒由包被有甲基对硫磷(MP)-载体蛋白偶联物的不透明白色酶标板、甲基对硫磷标准品、甲基对硫磷-过氧化物酶标记抗体工作液、发光底物液、浓缩样品稀释液、浓缩洗涤液组成。所述甲基对硫磷-载体蛋白偶联物是将甲基对硫磷与载体蛋白通过混合酸酐法或碳二亚胺法偶联得到,浓缩洗涤液含有0.05%吐温-20。本发明的试剂盒具有更高的灵敏度,且检测时间短、费用低,可用于水果、蔬菜、农作物等样品中甲基对硫磷(MP)的残留量检测。
本发明提供一种化学发光法定量检测阴道毛滴虫的试剂盒,在使用时,样本中的阴道毛滴虫抗原与试剂盒中的试剂反应生成中性亲和素微球‑捕获抗体‑抗原‑检测抗体‑吖啶酯复合物,洗涤除去未参加反应的物质,通过吖啶酯在碱性H2O2溶液中,分子受到过氧化氢离子进攻时,生成不稳定的二氧乙烷,二氧乙烷分解为CO2和电子激发态的N‑甲基吖啶酮,当其回到基态时发出光子,利用发光信号测量仪器测量光量子产额进行测定。同时通过校准品,拟合定量标准曲线,通过将样本的光信号测定结果代入到定量标准曲线中,计算出阴道毛滴虫的浓度。通过本发明提供的试剂盒进行阴道毛滴虫定量检测,灵敏度高、特异性好,能够准确检测样本中阴道毛滴虫的浓度。
本发明公开了一种用于检测过氧化氢的电极、电化学传感器及其检测方法,电极包括,基底电极;以及,至少部分与所述基底电极的表面连接的涂层;其中,所述涂层为硫化钼/石墨烯/纳米纤维素复合物。本发明将纳米纤维素应用于过氧化氢传感器电极,可有效吸附过氧化氢,提高过氧化氢的检测效率。
本实用新型公开一种基于光电检测的化学检测智能一体箱,所述一体箱内设有超声波助溶模块、紫外灯照射模块、蠕动泵模块、电磁阀模块、定时模块、光电转化模块和温度控制模块,所述一体箱外设有触摸屏总控制模块,所述触摸屏总控制模块分别与超声波助溶模块、紫外灯照射模块、蠕动泵模块、电磁阀模块、定时模块、光电转化模块、温度控制模块连接,所述超声波助溶模块用来对农药快速溶解,所述紫外线照射模块用来对农药进行光电转化处理,所述蠕动泵模块用来将抽取高锰酸钾溶液,将其置入漏斗中,并通过电磁阀控制高锰酸钾溶液的下滴,所述定时模块能够根据紫外灯照射所需要的时间采取定时功能,无需人工掐表计时。
本发明公开了一种用于检测含能材料NTO的电极,包括玻碳电极,所述玻碳电极的外围附着有m‑CN‑MWCNT薄膜,所述m‑CN‑MWCNT薄膜由多孔碳化氮(m‑CN)和多壁碳纳米管(MWCNT)混合溶液在玻碳电极表面生成。可以用于检测含能材料NTO,该方法制备的玻碳电极具有较好的选择性,可以抵抗干扰物,具有很好的重复性、重现性和稳定性,对NTO这种含能材料的电化学还原具有很好的催化性能,具有较高的灵敏度和较低的检测限,良好的选择性和稳定性。
本发明涉及一种降钙素原的化学发光定量检测试剂盒及其制备方法和检测方法,其试剂盒包括如下试剂:降钙素原系列标准品;磁分离试剂:偶联有链霉亲和素的磁微粒悬浮液;第一试剂:含N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯标记的抗降钙素原单克隆抗体溶液;第二试剂:含碱性磷酸酶标记的抗降钙素原单克隆抗体溶液。本发明通过采用偶联有链霉亲和素的磁微粒悬浮液、含N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯标记的抗降钙素原单克隆抗体溶液、含碱性磷酸酶标记的抗降钙素原单克隆抗体溶液制成的试剂盒,使得灵敏度达到0.008ng/mL,且准确性好、精密度高,样本无需预稀释,操作简单省时,检测范围宽。
本发明公开了一种检测胰岛素抗体各亚型的电化学发光法检测试剂盒,属于生物医药技术领域。所述试剂盒包括以下试剂:胰岛素原抗原蛋白,Sulfo‑TAG,生物素标记的抗Ig各亚型(包括IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgD、IgM、IgE)的抗体和MSD链霉亲和素平板。本发明在已有ECL检测法的基础上,通过采用生物素标记的抗Ig各亚型的抗体,使得待测抗体形成了全新的四个蛋白质分子的聚合物,从而介导了信号传导路径的改变,使检测信号得到了双倍的提升;同时实现了抗体亚型的精准分型,为临床诊疗带来了全新的提示。
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