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本发明公开了一种高尔基体蛋白73的化学检测方法，具体步骤化学发光板使用前每孔加200µl清洗液，等待30秒后甩尽清洗液；GP73系列标准品溶液，GP73系列质控品溶液，酶标GP73抗体溶液各20μl分别加入化学发光板微孔中，再加入样本稀释液80μl，震荡混匀后；甩去化学发光板孔内液体，每孔加200µl清洗液，等待30秒后甩尽清洗液；加入生物素标记抗体，每孔100µl，用封板膜封板；甩去孔内液体，每孔加200µl清洗液，等待30秒后甩尽清洗液，重复此操作5次；每孔加入100µl的链酶亲和素‑HRP，用封板膜封板；甩去孔内液体，每孔加200µl清洗液，等待30秒后甩尽清洗液；每孔分别加入50µl化学发光液A液和50µl化学发光液B液，立刻置于化学发光仪器中读数。
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本发明公开一种水质检测领域用于化学需氧量检测的阶梯式加药方法与装置，进出液总阀的上方是消解管模块，消解管模块下端通过消解管进出液口连接进出液总阀的上进出液口，进出液总阀的下端进出液口通过导管与进样蠕动泵的上端进出液口相连；消解模块包括消解管、加热丝、光接收器以及光源发射器，采用阶梯式分段分段加药反应，由每次分段检测出的COD值作为x和重铬酸钾药剂体积值作为y，建立直角坐标系，进行动态曲线拟合，根据动态曲线势能大小决定下一次是否添加药剂和添加药剂量的多少，动态地控制加药，从而达到控制氧化剂重铬酸钾剂量的目的，避免过量添加氧化剂，浪费药剂，有效地减少药剂的使用，降低水质COD检测成本。
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本实用新型提供一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统，系统包括检测卡和检测仪，能执行多种不同检测方法。所述检测卡设有一个以上试剂杯、样品杯、生理盐水杯、清洗剂杯和清洗水杯。所述样品杯为单孔杯或一个内部连通的双孔杯，双孔杯包括位于检测卡外侧的外侧杯和相对应的内侧杯，外侧杯的底部低于内侧杯的底部。所述检测仪包括控制及数据处理单元、一个吸样针及转移单元、检测盘旋转系统、检测单元、针清洗系统和检测杯废液排除单元；所述检测盘旋转系统带动检测卡高速旋转时，可将双孔杯全血的血细胞离心至外侧杯外壁，随后细胞由于比重较大沉降于外侧杯底部，内侧杯集聚血浆。同时具有对超线性样本不另消耗试剂和样本即可重测功能。
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本发明提供了一种检测伏马毒素B1的电化学适配体传感器的制备方法，包括如下步骤：步骤1、丝网印刷碳电极SPCE的预处理；步骤2、活化的FB1核酸适配体溶液的制备；步骤3、金纳米粒子修饰的丝网印刷碳电极的制备；步骤4、FB1核酸适配体修饰的AuNPs‑SPCE电极的制备；步骤5、电极表面多余活性位点的封闭。本发明采用金纳米粒子对电极表面进行修饰，一方面，大量的金纳米粒子负载在电极表面为免标记阻抗法检测起到信号放大的作用；另一方面，利用Au‑S键固定更多的巯基化的适配体在电极表面。所提出的FB1的阻抗检测方法具有操作更简便灵活，仪器设备更简单，试剂用量少，检测成本低廉等特点。
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本发明属于生物传感器技术领域，具体涉及一种用于Pb2+检测的双信号电化学生物传感方法。本发明通过电沉积金纳米粒子作为基底材料，使Fc修饰的Pb2+适配体在电极界面固定；当存在Pb2+时Fc‑Apt与Pb2+特异性结合发生构象变化，导致Fc信号分子靠近电极界面发生氧化还原反应，用ACV检测存在Pb2+时的Fc信号IFc，同时使用SWASV获取Pb2+的方波溶出伏安信号ISWASV，通过获得IFc和ISWASV信号实现对Pb2+的双信号精准检测；具备灵敏度高、选择性好、稳定性好，线性范围宽的优势，其中IFc检测的线性范围为1pM～10nM，ISWASV检测的线性范围为10pM～1μM。
本发明属于生物传感检测技术领域，具体涉及一种双信号放大电化学发光适配体传感器的制备方法及其检测Pb2+的应用；本发明旨在结合AuNCs的聚集诱导电化学发光和共振能量转移的双信号放大策略提高传感器的灵敏度，通过适配体传感技术提高选择性，构筑一种基于AuNCs/TEA体系的Pb2+适配体传感器；AuNCs的聚集诱导发光行为提供高的初始ECL信号，结合共振能量转移策略猝灭AuNCs的ECL信号，提供了高的“信号‑背景”比，从而提高了检测灵敏度，即铅离子一个数量级的变化使得ECL信号变化521a.u.；检测灵敏度高、选择性好、线性范围宽，为1.0×10‑10～1.0×10‑4mol/L。
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本发明属于电化学传感技术领域，涉及一种用于检测黄曲霉毒素B1的无标记比率均相电化学传感方法。利用AFB1与适配体的特异性识别释放触发DNA(hDNA)，在溶液中引发两个发夹DNA(HP1和HP2)的杂交链式反应，形成长双链DNA。随着游离亚甲基蓝嵌入双链DNA螺旋中，MB在溶液中的扩散速率降低，MB氧化电流IMB降低。而二茂铁在反应过程中始终保持游离态，IFc保持不变。通过测量比率信号IMB/IFc可实现对AFB1的快速、准确检测。该传感方法对AFB1的检测线性范围为100pg/mL～100ng/mL，检出限为38.8pg/mL。通过与国标方法HPLC‑MS对比，结果证明该传感方法灵敏度高、选择性好、准确可靠。
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本发明涉及一种用于乙醇检测的电化学气体传感器及其制备方法，属于传感器技术领域；本发明首先搭建工作电极，所用市售叉指金电极以二氧化硅为基底，取大小适中的玻璃，将叉指电极固定于玻璃顶端中部，在玻璃底端两侧包覆铜片，利用银丝将叉指电极与铜片相连接，从而制得工作电极；然后制备修饰溶液，修饰溶液为中性红溶液，苯胺溶液，硫酸溶液的混合溶液；最后将搭建好的工作电极置于所制得的修饰溶液中，利用循环伏安法进行扫描；本发明制备的PANI-PNR纳米粒子复合材料具有均匀致密的结构，有利于乙醇气体分子进行快速的吸附和脱附反应，提高了传感器的响应和回复速率；所制备的传感器具有灵敏度较高，选择性好，检测速度快，操作简单等优点。
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本发明涉及一种电化学适配体传感器检测痕量赭曲霉毒素A的方法，属于电化学传感器技术领域。首先对金电极进行DNA修饰；然后通过碱基互补配对作用组装适配体，进而捕获金纳米粒子标记的DNA；再在金纳米粒子表面组装富含G的DNA，以俘获大量的亚甲基蓝（MB）构建信号放大策略。最后以差分脉冲伏安扫描为检测手段，对一系列OTA标准溶液进行测定，得到MB的还原峰电流和OTA浓度之间的响应关系，绘制标准曲线。本发明旨在提供一种操作简单、灵敏度高、特异性强的适配体传感器制备方法用于痕量OTA的灵敏检测。
本发明属于生物传感器技术领域，具体涉及一种检测黄曲霉毒素B1的比率电化学生物传感器的制备方法。硫堇THI与还原氧化石墨烯rGO复合材料作为信标分子一，AFB1适配体携带的二茂铁作为信标分子二，带正电的壳聚糖通过静电吸附作用将两者连接并固定在玻碳电极表面。本发明中，引入AFB1适配体，提高了比率生物传感器毒素AFB1的高特异性；构思在适配体两端标记Fc信号，实现了对比率信号的放大。构筑的比率电化学生物传感器检测线性范围为0.01ng·mL‑1‑100ng·mL‑1,检出限为3.3pg·mL‑1。通过探究，该传感器的制备方法简单，选择性高，灵敏度高，重现性好，稳定性好，为检测实际样品中的AFB1提供良好的传感平台。
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本发明公开了一种脂蛋白相关磷脂酶A2化学发光酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括试剂 R1和试剂 R2，所述试剂R1为含5g/L聚乙二醇8000，10g/L氯化钠，4g/L EDTA，8g/L的蔗糖，2g/L牛血清蛋白，5g/L的吐温20，1g/L叠氮钠的0 .25M氯化铵缓冲液；试剂R2包括：采用化学交联法制备得到的包被有抗人载脂蛋白多克隆抗体的聚苯乙烯胶乳颗粒混合物，3g/L HEPES 缓冲液，阿斯巴甜，所述阿斯巴甜与试剂 R2 的重量体积比为 0.2：100g/L；2g/L的叠氮钠的0.1M氯化铵缓冲液；pH值为9.0。本发明的试剂盒具有检测灵敏度，准确度高，精密度好，检测范围内线性好，稳定性好，生产成 本低，空白吸光度低且具有抗干扰性能。
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本发明属于生物传感器和电化学检测领域，涉及一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的电化学方法；步骤为：首先制备得到丝网印刷电极；然后制备得到AFB1适配体与OTA适配体修饰电极，再将适配体修饰电极依次浸入AFB1、OTA、Tris‑HCl缓冲溶液配制的标准溶液和AFB1适配体互补链、OTA适配体互补链、Tris‑HCl缓冲溶液的混合液；最后，根据二茂铁的峰电流值、亚甲基蓝的峰电流值与AFB1和OTA浓度的关系，分别建立标准曲线；通过检测待测液的二茂铁和亚甲基蓝的峰电流值，即可实现样品中AFB1和OTA的同时检测；本发明能够对两种目标物同时检测，操作简便，并具有高灵敏度和高选择性。
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本发明提供了一种用于尿酸检测的电化学试纸及其制备方法与应用，属于医疗设备技术领域。所述电化学试纸包括工作电极和对电极，所述制备方法包括至少将所述工作电极分别浸泡在第一聚合物溶液中和第二聚合物溶液中，得到聚合物修饰的工作电极，在所述聚合物修饰的工作电极表面沉积花状纳米金颗粒，得到所述电化学试纸。采用本申请制备方法制备的电化学试纸抗污染能力强、稳定性好、重复性高，可应用于尿酸的检测。
本发明属于食品快速检测技术领域，涉及一种于花椒中芦丁和花椒酰胺同时检测的电化学传感器的制备方法；首先制备N‑rGO‑PEDOT材料、AuNCs材料，然后将玻碳电极用氧化铝打磨抛光成镜面，经超声洗涤、晾干，得到处理后的玻碳电极；将N‑rGO‑PEDOT材料分散在甲醇中，得到混合液，并滴加在处理后的玻碳电极表面，自然晾干后用蒸馏水冲洗，晾干后，再次滴加AuNCs材料，自然晾干后即获得电化学传感器；可用于花椒中芦丁和花椒酰胺同时检测；本发明传感器的制备简单、成本低、检测速度快、结果准确，并且可便携，还具有出色可重复性和稳定性，检测样品不需要复杂的前处理，适用于大规模花椒麻素的精准检测。
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本发明提供一种基于杂合生物膜的核黄素电化学检测方法及传感器，包括以下步骤：(1)将希瓦氏菌种接种至培养基活化后加入到含有反应缓冲溶液的容器中；(2)在步骤(1)的容器中加入无菌FeCl3溶液和无菌Na2S2O3溶液；(3)将参比电极、工作电极、对电极安装在容器中形成三电极系统；(4)在合成条件下，希瓦氏菌生成具有导电性的FeS纳米颗粒并覆盖于细胞表面形成电活性杂合细胞，电活性杂合细胞吸附于步骤(3)的工作电极上形成电活性杂合细胞生物膜，连接信号检测系统，形成生物电化学传感器；(5)在工作电极上加载外电压，加入希瓦氏菌的电子受体，再加入核黄素，检测并记录电流变化值，本发明实现了对核黄素的定量和超灵敏检测。
本发明涉及电化学检测和食品安全检测领域，涉及一种基于电化学传感技术的中华绒螯蟹活体中镉元素的检测方法；首先，预先吸入血淋巴抗凝剂，再从中华绒螯蟹足基部软膜处抽取血淋巴，与抗凝剂混合，得到混合物离心，吸取上清液，与醋酸缓冲溶液混合，得到样品；再将与镉标准溶液混合，配制添加不同浓度镉元素的样品；分别取原始样品以及添加不同浓度镉元素的样品，滴涂到丝网印刷电极三电极，通过差分脉冲伏安法，记录镉元素溶出伏安曲线；通过镉元素峰电流值与加入镉元素的浓度建立标准曲线，曲线与横坐标交点的绝对值，即为样品中镉元素的浓度。本发明通过采集生物体液，无需破坏检测对象；并且有效简化了样品前处理程序，缩短了样品前处理时间。
本发明公开了一种检测不同土壤化学计量比小麦根际土壤微生物数量的方法，涉及生态环境保护领域。其步骤是：分别采集小麦在不同土壤化学计量比的根际土壤，将根际土壤在20?300C下风干，过2?3mm筛后溶于去离子水，得到混合液；测定土壤含水量：先将铝盒放在烘箱中烘干，取出铝盒置于下部放有部分干燥硅胶的干燥器中冷却至室温，称量烘干土壤+铝盒的重量；土壤悬浮液制备：称取风干的新鲜土壤样品，置于经灭菌的锥形瓶中，得到土壤悬浮液；培养基制备；接种于培养；计数与计算。本发明检测方法操作简单，有效克服了土壤腐殖质的干扰，能够对不同土壤化学计量比小麦根际土壤微生物数量变化做出准确测定。
本发明属于肉制品质量检测技术领域，涉及一种基于立方Ia3d结构介孔碳的电化学传感器检测腌制肉中亚硝酸盐的方法。方法为：首先采用硬模板法合成了具有Ia3d结构的有序介孔碳CMK‑8，并通过静电吸附作用将带正电的金纳米颗粒AuNPs紧密的结合在带负电的CMK‑8的有序孔道内外得到复合材料，并滴加在经过处理的玻碳电极表面，经红外干燥后得到工作电极，在其表面滴加血红蛋白溶液，经干燥、清洗、再次干燥后得到电化学传感器，可应用于腌制肉中亚硝酸盐的检测；本发明不仅有效地提高了NO2‑检测过程中的灵敏度、稳定性和选择性，而且可以重复使用，操作步骤简单、快速，能够实现食品中亚硝酸盐含量的大规模检测。
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本发明提供一种增强吸附电化学免疫传感器及其制备方法和检测方法，包括以下步骤：柔性振动电极体系的制作：通过柔性夹层基板的光刻、三电极系统的构建、振动器件的组装，得到柔性振动电极体系；传感器敏感面的功能修饰：在柔性振动电极体系工作电极表面加入吡虫啉抗体，得到敏感面修饰后的增强吸附电化学免疫传感器。本发明应用柔性电路板制作技术和材料来简化传感器制造，将吡虫啉作为抗原，引入吡虫啉抗体识别吡虫啉的方法使得传感器有着高效的选择性，振动马达与柔性三电极体系的传感器集成在一起，以改善吡虫啉吸附过程，缩短了反应时间，提高了检测效率。本发明可以实现对吡虫啉的快速检测，具有传感器制作简单，成本低，便于携带等优点。
本发明属于生物传感器技术领域，公开了一种原位比率光电化学免疫传感器制备方法，将其应用于转基因作物中Cry1Ab蛋白的检测。以Au NRs和MB作为双敏化剂，实现PEC信号的双重放大。一方面，以具有SPR效应的Au NRs修饰CdTe QDs作为光电层，实现了初始信号放大。另一方面，将作为PEC信号增强剂的MB嵌入dsDNA中，实现信号二次放大。分别以加入目标物后的光电流和引入MB敏化的Ab2‑CdSe QDs‑dsDNA产生的光电流做比值，定量检测Cry1Ab浓度。两信号在同一电极获取，两者互为参考，有效地降低了溶液基质及环境因素对电极的干扰。该光电化学传感器检测范围为0.01‑100ng·mL‑1，检出限低至1.4pg·mL‑1。本发明构建的原位比率PEC传感器具有良好的稳定性、选择性和重现性，实现转基因作物中Cry1Ab蛋白的灵敏检测。
本发明提供了一种通过磁控电化学适配体传感器同时检测两种霉菌毒素的方法，包括如下步骤：金纳米粒子包覆的Fe3O4微球的水分散液的制备；水溶性碲化镉量子点溶液和水溶性硫化铅量子点溶液的制备；单分散硅烷化SiO2纳米粒子水分散液的制备；碲化镉量子点包覆的SiO2纳米球分散液和硫化铅量子点包覆的SiO2纳米球分散液的制备；MB-aptamer1和MB-aptamer2捕获探针的制备；适配体1的互补链与SiO2@PbS偶联得到cDNA1-SiO2@PbS以及适配体2的互补链与SiO2@CdTe偶联得到cDNA2-SiO2@CdTe纳米生物探针的制备；MB-aptamer1/DNA1-SiO2@PbS和MB-aptamer2/DNA2-SiO2@CdTe纳米生物复合材料的制备；传感器的构建及样品的检测。本发明使用的丝网印刷电极结构简单，加工方法简便、成本低，具有检测方法操作方便、检测灵敏度高等特点。
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本发明涉及一种富马酸的生物电化学检测方法，属于生化检测技术领域。该方法用于对富马酸的专一性检测，将活化培养的希瓦氏菌的菌液和缓冲液混合共同作为生物电化学传感器的反应液，将含富马酸的样品加入生物电化学传感器的反应液中，控制一定的电位，检测输出电流信号的变化，根据电流响应和富马酸浓度变化关系来计算测定样品中的富马酸浓度。该检测方法不依赖大型仪器设备，降低了测定成本和操作难度，不受富马酸结构类似物干扰，专一性强，准确性高，高效快速，测验结果准确可靠，可应用于生化样品的检测、食品药品的检测、肿瘤的筛查和诊断。
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本发明属于光电材料以及光电化学检测领域，提供一种检测双酚A的光电化学适配体传感器的制备方法，包括如下步骤：首先，将一定量铜的氯代咪唑离子液体、乙醇溶液、g‑CN和氢氧化钠溶液置于聚四氟乙烯内衬高压釜中，将高压釜放入烘箱中反应，反应结束后自然冷却至室温。最后，将所得产物离心，洗涤，干燥，得到CuO/g‑CN复合光电材料。将制备的CuO/g‑CN复合光电材料修饰于ITO导电玻璃上，并组装双酚A适配体，构建光电化学适配体传感器。本发明所使用的电极材料是在可见光区响应的CuO/g‑CN光电复合材料，探索了其优越的光电性能，拓宽了g‑CN基材料在光电领域的应用，也为光电检测找到了一种新型材料。构建的光电化学适配体传感器具有较高的检测灵敏度，且抗干扰能力强。
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本发明属于生物传感器技术领域，具体涉及一种检测土霉素的光电化学生物传感器的制备方法及其应用。通过水相合成法将具有化学稳定性好、带隙窄等优点的Bi2S3与CN相复合构筑新型高性能光敏复合材料‑直接Z型异质结，实现光电信号放大机制；进一步引入土霉素适配体，实现土霉素与适配体特异性识别，从而构建得到高性能光电化学生物传感器，并实现对土霉素的特异性检测，该传感器在0.001～1000nM范围内具有良好的线性范围，检出限为0.6pM。本发明构建的光电生物传感器背景信号低、灵敏度高、选择性好，为检测土霉素提供良好的传感平台。
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本发明属于电化学传感器技术领域，具体涉及一种检测Aβ聚集状态的电化学传感器及制备方法与应用。本发明基于Aβ42肽的Tyr‑10残基电氧化产生的氧化Ip值的变化实现Aβ42肽聚集和降解的定量估计及其寡聚体降解状态的实时检测。采用CV和SWV对传感器的性能和特性进行表征，准确捕捉电化学信号的变化。具有特异性强、灵敏度高的优点。使用本发明所提供的电化学传感器对阿尔茨海默病的致病多肽淀粉样多肽Aβ42的寡聚体状态进行检测，可以快捷、高效的辅助开发治疗阿尔茨海默病的药物，极大的缩短药物开发周期；在治疗阿尔茨海默病药物研发领域中具有重要的应用价值。
本发明提供了一种基于钌(II)配合物的可视化电化学发光传感器的构建方法，利用BiOI对Ru(bpy)32+的固定增强效果，无需采用传统的光电倍增(PMT)放大策略，在ITO上设计两个区域，实现将可视化单元和检测单元分开，基于钌(II)配合物发光体发光强度变化的电化学发光可视化检测，步骤如下：步骤1、制备发光材料联吡啶钌碘氧铋复合微球(Ru(bpy)32+/BiOI)；步骤2、构建检测赭曲霉毒素A的可视化电化学发光适配体传感器件。基于此提供集快速、简单、微型化、使用模式灵活等优点为一体的便携式检测模式，能够实现现场快速检测。
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本发明涉及一种基于钴酞菁模拟酶性质、乙醇淬灭特性的农药西维因电化学发光方法的建立，属于电化学发光传感领域。首先利用简单的平衡吸附法制备了钴酞菁和石墨烯氧化物的复合材料（GO-CoPc）；然后将其修饰在玻碳电极表面，利用复合材料的模拟酶性质和信号放大作用，以luminol为发光剂，乙醇为信号淬灭剂构建电化学发光传感平台；进一步在体系中加入不同浓度的西维因标准溶液进行测定，得到西维因浓度和电化学发光强度之间的对应关系，建立了灵敏检测农药西维因的传感平台。本发明旨在发明一种制备工艺简单，灵敏度高、检测成本低的电化学发光西维因传感器。
本发明属于生物传感器技术领域，涉及一种自参比比率电化学生物传感器的构建方法及其黄曲霉毒素B1检测应用。首先将金纳米粒子修饰到玻碳电极表面，然后通过Au‑S键自组装sDNA，反应后再滴加MCH，经常温孵育封闭非特异性结合位点，然后，在电极表面引入携带Fc的适配体和辅助DNA，得到电化学生物传感器；在其表面修饰AFB1，通过测定传感器电流值，与AFB1浓度构建得到标准曲线；最后通过测定未知样品的电流值，代入构建的标准曲线，即可实现未知样品中AFB1的检测；本发明以单一的信号探针构建自参比比率传感器，得到更可靠更具有抗环境干扰能力的电化学信号，检测选择性好、速度快、灵敏度高。
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本发明公开了一种自供能的水体硝酸根微生物电化学检测方法。本发明检测方法采用的微生物电化学传感器包含一个用于驱动的微生物燃料电池，和一个用于硝酸根检测的微生物燃料电池；串联驱动电池与检测电池，利用驱动电池为检测电池的生物阴极供能，提高其电极电势，强化检测性能。本发明建立一种微生物燃料电池堆栈的生物阴极电压调控策略，使生物阴极的工作电压在检测过程中动态维持在可充分保证检测性能的区间。
本发明属于生物传感器技术领域，涉及一种基于等离子体增强的光电化学免疫传感器制备方法，并将其应用于Cry1Ab蛋白的检测。具体以聚酰胺‑胺(PAMAM)树枝状大分子为空间限域的模板，结合其粒子尺寸效应调控，制备的PAMAM‑Au纳米材料具有良好的分散稳定性。通过Au NPs作为等离子体光敏剂和电子继电器的双重作用，抑制光敏材料CdSe QDs电子空穴对复合，实现光电信号放大策略。本发明中，引入Cry1Ab的抗体，实现抗原‑抗体特异性识别，从而提高光电化学传感器用于Cry1Ab蛋白的特异性检测。构筑的光电化学免疫传感器检测线性范围为0.01ng·mL‑1‑100ng·mL‑1，检出限为0.003pg·mL‑1。本发明构建的光电传感器背景信号低、灵敏度高、选择性高、稳定性好，为检测转基因作物中的Cry1Ab蛋白提供良好的传感平台。
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