本发明公开了一种哺乳动物细胞表达启动子及其制造和使用方法,该方法包括以下步骤:步骤一,通过化学合成的方式合成引物;步骤二,通过PCR反应,获得启动子序列;步骤三,通过限制性酶切位点:BglII?和Kpn1,上述启动子序列插入包含有ori、卡纳抗性基因、sv40、sv40?polyA、多酶切位点序列的质粒骨架中,得到?pHep/L1质粒;步骤四,转染入E.Coli大肠杆菌进行质粒扩增,提取质粒,进行测序;步骤五,将新获得的质粒插入SEAP和IL10目的基因,通过CsCL密度梯度离心法提取纯净质粒。本发明提高现有质粒和AAV病毒的表达效率。
声明:
“哺乳动物细胞表达启动子及其制造和使用方法” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究,如用于商业用途,请联系该技术所有人。
我是此专利(论文)的发明人(作者)