公开了一种用于构建条形码化的单链DNA文库的方法和试剂盒。该方法包括制备单链DNA分子,它们每一个具有去磷酸化的5’末端;将第一衔接子连接至每个单链DNA分子的3’末端;以及合成连接至第一衔接子的第一链的每个单链DNA分子的互补链。该试剂盒包括具有第一链的第一衔接子,其从5’末端到3’末端包括磷酸基团、条形码序列和第一引物识别序列。该试剂盒还包括DNA连接酶,其用于在第一衔接子的第一链的5’末端与每个单链DNA分子之间进行连接,以及第一引物,其用于合成互补链的。该方法使得能够和从低质量和低数量的核酸样品中分析稀有突变。
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