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快速高通量的基因定点诱变方法

1013   编辑：管理员   来源：中冶有色技术网  
2023-03-19 07:33:29
本发明提出了一种快速高通量的基因定点诱变方法,其步骤为:1.构建了一个表达DPNI限制性内切酶的DNA腺嘌呤甲基化酶缺陷的用于定点诱变的菌株;2.根据需要对基因待突变的位置进行序列分析,设计部分重叠(10～16NT)的PCR诱变引物;3.反向PCR扩增;4.扩增后的PCR产物直接化学法转化上述构建的表达DPNI的DNA腺嘌呤甲基化酶缺陷的菌株,这样经过DPNI体内筛选就可以得到携有预定突变的质粒。本发明能够真正做到简单快速的定点诱变,且不需订购特殊修饰的引物,不需要对PCR后的产物进行任何处理步骤(酶切连接,体外杂交,胶回收和体外DPNI的消化处理等)就能方便迅速地构建突变质粒。
声明：
“快速高通量的基因定点诱变方法” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究，如用于商业用途，请联系该技术所有人。
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