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基因重组的大肠杆菌及其在发酵制备芸苔素内酯中的应用

958   编辑：管理员   来源：中冶有色技术网  
2023-03-19 07:31:09
本发明为基因重组的大肠杆菌及其在发酵制备芸苔素内酯上的应用，解决了化学合成工艺复杂，环境污染大的问题。提取油菜植株各器官的总RNA，经逆转录和PCR技术得到CYP90B1、CYP90C1、CYP85A2三个基因的PCR产物，将PCR产物分别克隆到pGEM‑Teasy载体，测序分析得到正确的基因序列。含目的基因的克隆载体经相应的内切酶酶切后连接到表达载体pET‑28a(+)上，测序分析得到三种重组的表达载体，三种重组表达载体同时转化同一目标菌大肠杆菌BL21(DE3)，经筛选得到可以同时表达三个蛋白的大肠杆菌BL21(DE3)‑BL。大肠杆菌BL21(DE3)‑BL菌液接种到添加了底物麦角甾醇、甲羟戊酸和诱导物的发酵培养基中，调节发酵参数，补料进行连续发酵。发酵液用乙酸乙酯提取结晶或过层析柱制得芸苔素内酯。
声明：
“基因重组的大肠杆菌及其在发酵制备芸苔素内酯中的应用” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究，如用于商业用途，请联系该技术所有人。
我是此专利(论文)的发明人(作者)
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化学分析
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