本发明提供了一套双探针基因
芯片信号放大方法。其原理是设计两个或多个与靶基因特异性位点的碱基序列互补的两个或多个探针,即捕获探针和标记探针。其中以固定于基因芯片上微点阵中核酸探针为捕获探针,另外至少一个与待测靶基因特异性位点碱基序列互补配对的核酸上通过化学共价键或非共价键连接高荷信号载体,成为标记探针。后者实际上是一种有强大信号放大能力的标记靶基因。通过将各种不同形式的高荷信号载体[HSC]应用于基因芯片的信号放大标记和检测过程,从而大大地提高了基因芯片信号检测灵敏度和信噪比。通过制备大量标记靶基因或标记探针,可以实现对不同核酸分子的高通量分析。在一些实施例中,各种HSC如高分子荧光微球、量子点[QD]、树形分子[Dendrimers]、多聚二茂铁、量子点微球[QD-tagged Beads]等被应用于基因芯片、微流体电泳芯片等生物芯片的检测中。利用该技术标记之后的微阵列,在激光共聚焦扫描仪、CCD、荧光显微镜和等离子体共振激发技术等条件下,可以检测到在微阵列上发生的单个标记事件,因而是一种微阵列超灵敏检测技术。该技术尤其适合于临床诊断等领域的基因芯片检测。
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