采用去毒重组大肠杆菌(E.coli)不耐热肠毒素突变体LTS61K作为载体蛋白来偶联多糖。所述LTS61K含有在氨基酸位置61处包括赖氨酸的突变成熟亚单元A(LTA)和野生型成熟亚单元B(LTB)。通过还原胺化反应将各种类型的细菌荚膜多糖抗原与所述LTS61K蛋白化学偶联。所述偶联多糖-LTS61K产物已以物理、化学和生物化学方式识别为可溶形式。以肌内方式对兔进行免疫以通过检测抗多糖抗原IgG效价的ELISA和血清杀菌分析测定偶联疫苗的免疫原性,由此测定抗体的功能活性。研究结果显示,偶联多糖-LTS61K疫苗相比于单独的多糖或与LTS61K混合的多糖在血清中诱导更高的多糖特异性IgG效价和更大的杀菌活性。抗LTS61K血清IgG抗体的存在减轻由大肠杆菌(ETEC肠毒性大肠杆菌)引起的旅行性腹泻。
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