本发明公开了一种解旋酶水解ATP活性测定方法。针对现有技术中测定解旋酶水解ATP活性采用放射性标记法,存在放射性物质使用风险、操作时间长的缺陷,本发明提供了一种测定解旋酶水解ATP活性的方法。本方法采用Tris-HCl、NaCl、MgCl2、DTT等溶液混合制成反应液加入由解旋酶与ATP底物组成的解旋酶水解ATP体系,反应后加入由孔雀石绿、钼酸铵、吐温-20等溶液混合制成的反应终止液,显色后测定生成的蓝色络合物在650nm下的吸光度,计算解旋酶水解ATP生成的正磷酸浓度并由此计算出解旋酶水解ATP活性。本发明方法原理可靠,试剂及操作均为常规化学试剂,无放射性污染,安全性高;方法反应快捷、测定周期短;测定仪器常规,测算结果精度高,成本经济,且能够适用于批量样品测定。
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