本发明属于分析化学领域,具体涉及用液相色谱法分离测定艾塞那肽及其中杂肽的方法,对艾塞那肽溶液进行分离测定,液相色谱法所用的色谱柱中,固定相为烷基键合硅胶,流动相为乙腈-磷酸盐溶液,其中,以磷酸盐溶液或含有适量乙腈的磷酸盐溶液为流动相A,磷酸盐溶液的浓度为0.01~0.1mol/L;以乙腈或含有适量磷酸盐溶液的乙腈为流动相B,采用乙腈进行梯度洗脱,且按体积比计流动相B占整个流动相的浓度梯度范围为10~90%;所述的艾塞那肽溶液的浓度为1ml溶液/0.1~5mg艾塞那肽;取艾塞那肽溶液放入液相色谱仪中,进行艾塞那肽及其中杂肽的分离和测定。本发明可以分离出三氟乙酸分析体系检测不到的杂肽,更好的控制艾塞那肽原料药的质量。
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