本发明涉及一种检测溶液中MMP9蛋白的方法,该方法包括以下步骤:⑴设计MMP9特异性小分子配体;⑵小分子配体的化学合成:①制备KF-CaF2熔融物:②制备对甲基苯磺酰氟;③采用催化剂LDA进行反应得化合物Ⅰ;④HCL气体脱去反应物上Boc基团,得化合物Ⅱ;⑤采用催化剂三乙胺进行反应得化合物Ⅲ;⑥化合物Ⅱ与化合物Ⅲ反应得化合物Ⅳ;⑦化合物Ⅳ与NaOH溶液进行反应得化合物Ⅴ;⑧采用催化剂为O-(四氢-2H-吡喃-2-基)羟基胺、NMM、HOBT和EDC进行反应得化合物Ⅵ;⑨化合物Ⅵ脱去保护基团得MMP9小分子配体;⑶SPR法检测溶液中的MMP9:ⅰ裸金膜
芯片的修饰;ⅱ小分子配体的固定;ⅲ非特异性小分子吸附的排除;ⅳ检测溶液中的MMP9蛋白;ⅴMMP9非特异性蛋白吸附的排除。本发明方法灵敏度高。
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