本发明提供了一种修饰的PNP及其制备和在5’‑核苷酸酶检测中的应用,涉及到医学免疫体外诊断领域,所述修饰的PNP为PNP的氨基酸侧链经酰化修饰。并由其制备了稳定的5’‑核苷酸检测试剂盒,包括试剂R1和试剂R2;所述试剂R1包括缓冲液、4‑AA、修饰的嘌呤核苷磷酸氧化酶、过氧化物酶、黄嘌呤氧化酶、防腐剂、除干扰剂;所述试剂R2包括缓冲液,5’‑核苷磷酸盐。本发明对5’核苷酸酶检测的酶比色法加以改进,通过对参与反应的嘌呤核苷磷酸氧化酶(PNP)进行化学修饰,使试剂抗干扰能力增强达到灵敏度高的效果。
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