本发明涉及一种检测肺组织胶原的非标记定量方法的建立,该方法包括以下步骤:步骤1:将矽肺模型的小鼠肺组织和正常小鼠的肺组织放入30%蔗糖进行沉糖处理,在冰冻切片机内进行包埋,然后常规行冰冻切片操作处理;步骤2:使用WITec‑α300拉曼显微光谱仪检测冰冻切片中的肺组织细胞,每组样本在不同位置重复采集150‑200个拉曼图谱,对所有图谱统一进行基线校准、去宇宙射线和面积归一化处理;步骤3:确定胶原特征峰1248cm‑1和1488cm‑1后将峰强度值进行统计分析,得出对照组和矽肺组肺组织切片胶原蛋白含量。本发明所涉及的一种检测肺组织胶原的非标记定量方法的建立可以准确快速对肺组织的胶原蛋白含量进行测定,对组织切片无伤害,切片可以进行后续实验;拉曼光谱成像系统可以快速大面积扫面成像以获得组织不同组分的精确信息;与传统的化学染色方法相比,可以去除颗粒在肺组织中产生的特异性荧光的干扰。光谱获得的信息具有通光效率高、灵敏度高、重复性好的优点。
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