本发明提供了能和磷酸酶反应产生化学发光的新的杂环化合物及其制备工艺和在其中有用的中间体。该化合物包括一个含有N,O或者S的并带有一个外向环的碳-碳双键的杂环系统。该双键的远侧碳末端被磷酸基和含有一个O或者S原子的基团取代。本发明还提供了新的组合物,其除了含有该杂环磷酸酯化合物外,还含有一种阳离子芳香族化合物(CAC)。而在该组合物中加入AC可大大地增加化学发光的产生并改善检测灵敏度。而那些还含有阴离子型表面活性剂和非离子型表面活性剂的组合物则可进一步改善检测灵敏度。该新的化学发光化合物和组合物可应用于发光的方法中,磷酸酶和酶抑制剂的检测中以及那些用酶标记的特异结合对的检测中。
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