本发明属蛋白质分析技术领域,具体为一种二/三甲基化(Kme2/3)修饰肽段富集和质谱分析的方法。本发明方法包括:对蛋白上未修饰(Kme0)或者单甲基化(Kme1)修饰的赖氨酸进行衍生化使其带上生物素标记,再将蛋白酶解成肽段后,再加入亲和素偶联的琼脂糖微球,通过生物素和亲和素之间的高特异和高亲和作用,除去Kme0/1肽段,在上清中保留Kme2/3修饰肽段,最后利用除盐柱捕获上清中的肽段,送入质谱分析质谱分析Kme2/3修饰肽段。本发明方法首次实现对Kme2/3修饰肽段的化学富集,能显著地提高Kme2/3修饰肽段的分析质谱选择性,并且具有特异性强、重现性好、步骤简单、操作方便等特点。
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