本发明公开了一种基于磷酸盐柱[5]芳烃测定T4多聚核苷酸激酶活性的
电化学分析方法,包括如下步骤:以磷酸盐柱[5]芳烃PP5作为主体,亚甲基蓝MB作为客体分子,利用二氧化钛TiO2的介导作用,构建了一种电化学生物传感器用于T4PNK活性检测;设计的DNA底物链通过形成金‑硫键固定在金电极表面,当存在ATP和T4PNK时,DNA底物链末端‑OH被磷酸化‑PO4,以TiO2纳米粒子作为介导,将磷酸盐柱[5]芳烃连接到电极表面,磷酸盐柱[5]芳烃与亚甲基蓝通过主体和客体识别作用发生络合,实现电化学响应信号放大;产生的电化学信号与T4PNK浓度成正比,实现对T4PNK的高灵敏度和高选择性测定。
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