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本发明公开了一种用于胆碱检测的电化学传感器及其制备方法，其中，电化学传感器包括依次层叠设置的金属电极层、聚合物层和传感层；所述金属电极层选自铂、金、银中的至少一种，所述金属电极层的厚度为1000‑2000纳米；所述聚合物层为聚间苯二胺、聚对苯二胺、聚邻苯二胺中的至少一种，所述聚合物层的厚度为300‑500纳米；所述传感层包括MXene，所述传感层的厚度为14000‑18000纳米。上述用于胆碱检测的电化学传感器具备高灵敏度、低检测限、快速的响应速度，以及优异的抗电化学干扰性能。
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本发明公开了一种地沟油中辣椒素类物质的电化学检测方法。本发明采用金纳米粒子/磁性四氧化三铁(AuNPs/Fe3O4)纳米复合材料，通过Au‑S键将4‑氨基苯硫酚(4‑ATP)固定于AuNPs上，将地沟油经液‑液萃取所得的辣椒素类物质(Caps)与重氮化反应后的AuNPs/Fe3O4‑ATP发生偶合反应，形成AuNPs/Fe3O4‑ATP‑azo‑Caps复合物，利用外加磁场将该复合物富集于丝网印刷碳电极工作电极表面。采用示差脉冲伏安法进行电化学检测，根据电化学响应信号与待测物浓度之间的线性关系，实现地沟油样品中辣椒素类物质的灵敏、高效、准确的定量检测，为地沟油的鉴定提供关键技术支撑。
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本实用新型公开了P16MCM2免疫细胞化学双染法检测试剂盒，包括盒体和托高台，所述盒体内壁贴合有衬垫，且衬垫上表面设置有无菌装置孔，所述衬垫左边分布有第一凹槽，且第一凹槽一侧分布有第二凹槽，所述第二凹槽一侧分布有第三凹槽，所述第一凹槽右侧分布有第四凹槽，且第四凹槽一侧分布有第五凹槽，所述第五凹槽一侧分布有第六凹槽，所述托高台设置于第一凹槽上端。该P16MCM2免疫细胞化学双染法检测试剂盒设置有第一凹槽，P16/MCM2的免疫细胞化学双染法的结果显示在同一张样本制片上，即在同一张样本制片上显示结果，提高了实验人员的病理阅片的准确性，便于观察，检测的准确率提高，降低了假阳性及假阴性的可能，降低了误判的可能性。
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本发明属于电化学传感器技术领域，具体公开了一种检测外泌体miRNA的电化学传感器及其制备与应用，其工作电极制备方法如下：将T型结构复合物(Ts)、燃料链F、靶序列T混合，得混合液，孵育得扩增产物；将捕获探针固定至金电极表面，再将扩增产物滴加到固定有捕获探针的金电极表面，制得熵驱动的链置换循环放大体系；将亚甲蓝(MB)与DNA纳米片混合反应得到MB‑DNS混合物，然后将DNS混合物滴加到金电极表面，孵育，得到DNA纳米片纳米分子放大检测体系，即完成所述工作电极的制备。本发明成功构建了一种DNS纳米分子和级联T型结构相结合的电化学传感器，用于检测外泌体miRNA，灵敏度高，反应速度快，稳定性和重现性好。
本发明涉及可用于LPL基因SNP(rs1801177)检测的电化学DNA生物传感器的制备方法，属于电化学检测技术领域。其特征在于：首先在氮掺杂石墨烯(N‑G)片表面负载大量钯铂双金属(PdPt)纳米粒子，然后在其表面原位聚合形成聚苯胺得到纳米复合材料，接着将单链DNA信号探针与该复合材料混合，制得氧化还原探针；然后通过C60/PAMAM/Au纳米复合材料将捕获探针固定在传感器表面，从而制备了对rs1801177进行定量检测的电化学DNA生物传感器，该传感器成功用于脂蛋白脂肪酶基因的单碱基突变的检测。本发明的优点在于灵敏度高，特异性强，检测方便、快捷，为rs1801177的检测提供了新方法，也为心血管疾病的临床诊断与预防提供了理论依据和实验基础。
核酸是人体重要的遗传物质，在存储，复制和传递遗传信息中发挥重要作用，甲基化DNA是主要表观遗传学修饰方式之一，异常的DNA序列，碱基突变和表观遗传学变化常导致癌症的发生，为实现早期靶标检测，我们设计一个四面体辅助多串联发夹级联组装检测靶标（DNA/RNA/甲基化DNA等）的通用电化学传感器，孵育多个发夹级联组装触发信号扩增反应，电信号检测在RuHex溶液中实现，其强有力的静电吸引作用到DNA磷酸骨架上导致DPV电流响应增加。靶标检测线性浓度范围为10 aM至100 pM，最低检测限到1.78 aM。借助特异性酶切反应，在电化学平台上孵育甲基化DNA进行相关实验进一步证明该平台的优越性。
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本发明涉及一种带DNA分子探针的石墨烯微电极电化学检测传感器，包括电极区域、电极和连接金线；所述电极区域由工作电极区域(9)、参比电极区域(10)和对电极区域(8)组成，工作电极区域上并列设置四个带DNA分子探针石墨烯微电极，连接石墨烯电极连接金线(6)，再通过电极夹(5)与电极转向控制器(4)连接至工作电极(2)，四个带DNA分子探针石墨烯微电极共用参比电极(1)和对电极(3)，参比电极和对电极分别通过电极连接金线(11)与参比电极区域(10)和对电极区域(8)相接。本发明可以同时检测四种不同miRNA，达到高通量检测目的，检测快速方便，且具有高灵敏度、高选择性、高准确度、无需标记等优点。
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本实用新型公开了一种用于检测巨细胞病毒PP65抗原的电化学免疫传感器。所述用于检测巨细胞病毒PP65抗原的电化学免疫传感器，包括电极、电极修饰膜和巨细胞病毒抗体层，所述电极修饰膜粘附在电极表面，所述巨细胞病毒抗体层设在电极修饰膜上。本实用新型用于检测巨细胞病毒PP65抗原的电化学免疫传感器灵敏度高、特异性强，能够用于对巨细胞病毒抗原进行快速定量检测。
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本发明涉及重金属铅污染物检测的电化学传感器的制备方法及应用，属于电化学检测技术领域。其特征在于：首先合成得到Fe‑MOFs纳米材料，然后将钯铂双金属纳米粒子还原在Fe‑MOFs纳米材料上，再使发夹状DNA信号探针与该复合材料混合，制得生物信号探针；然后通过rGO‑TEPA，亲和素，层层自组装用于“8‑17”DNAzyme的固定，从而制备了重金属铅离子检测的电化学传感器，该传感器成功的用于环境中铅污染物的检测。本发明的优点在于灵敏度高，特异性强，检测迅速，方便。本发明为铅污染检测技术的研发提供实验依据，为环境中铅污染的监测提供新思路和新技术平台。
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本发明公开了一种基于包埋多巴胺的小单层脂质体的电化学免疫检测方法。该检测方法通过胃泌素前体释放肽(ProGRP)抗体与待测样品中胃泌素前体释放肽(ProGRP)发生特异性免疫反应,加入包埋多巴胺的小单层脂质体和胃泌素前体释放肽(ProGRP)抗体的共耦合物,经表面活性剂破乳,释放出电活性分子多巴胺,利用多壁碳纳米管(MWNT)修饰玻碳电极作为工作电极,通过检测多巴胺的线性扫描伏安峰电流信号强度来检测待测样品中胃泌素前体释放肽的浓度。本发明提供的电化学免疫检测方法线性响应范围为50～1000pg/ml,检测下限为16pg/ml,特异性好,灵敏度高,对小细胞肺癌(SCLC)的诊断具有重要意义。
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本发明公开了一种高灵敏的吲哚电化学检测方法。本发明采用金磁纳米粒子(GMPs)复合材料，通过Au‑S键将4‑氨基苯硫酚(4‑ATP)固定于AuNPs上，将吲哚与重氮化反应后的ATP@GMPs发生偶合反应，形成Indole‑diazo‑ATP@GMPs复合物，利用外加磁场将该复合物富集于丝网印刷碳电极工作电极表面。采用示差脉冲伏安法进行电化学检测，根据电化学响应信号与待测物浓度之间的线性关系，实现对吲哚的灵敏、高效、准确的定量检测。
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本发明公开了一种基于滚环扩增和超分子适体对可卡因进行电化学检测的方法，在洗净的金电极上滴加适体片段Co3S，冰箱中过夜后取出封闭，在金电极上滴加适体片段Co3B和待测样品，37℃下反应完后，再滴加链酶亲和素溶液温育，然后加入环化DNA溶液温育，滚环扩增，加入检测探针杂交，进行DPV信号检测。本发明首次利用滚环扩增与超分子适体对可卡因进行电化学检测，极大提高了可卡因检测的灵敏度和特异性，使得检测的线性范围达到10～500nM。使用相同体积和相同浓度的链酶亲和素溶液和环化DNA，将识别元件和放大元件分开，仅利用其桥接作用，减少了空白信号，极大提高了检测的灵敏度和线性范围。
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本实用新型公开了P16MCM2免疫组织化学双染法检测试剂盒，包括盒体、抗体稀释液放置框和DAB染色底物放置框，所述盒体的内部分布有衬垫，且衬垫的上部一侧设置有无菌放置框，所述盒体上部外端连接有副盖。该P16MCM2免疫组织化学双染法检测试剂盒在染色过程中，将两种蛋白的一抗混合后孵育样本，同时在一张样本制片上检测两种蛋白的表达，在准确筛查宫颈癌早期的前提下，几乎加快了一倍的检测速度，这点优于同类的免疫组织化学单染检测P16基因或者仅检测MCM2基因试剂盒，P16/MCM2的免疫组织化学双染法的结果显示在同一张样本制片上，即在同一张样本制片上显示结果，提高了实验人员的病理阅片的准确性，便于观察，降低了假阳性及假阴性的可能，降低了误判的可能性。
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本实用新型公开了免疫细胞化学四染法检测试剂盒，包括盒体1，盒体1的内部设置有衬垫2，衬垫2的顶部开设有容器孔3，容器孔3的数量为七个，衬垫2的顶部开设有位于容器孔3右侧的无菌装置孔4，无菌装置孔4的数量为四个。本实用新型结构紧凑、携带方便、重复性好、省时省力，P16/Ki‑67、MCM2/TOP2A的免疫细胞化学四染色检测高效，稳定，能够很好的满足科学、工作的需要，解决了单次通过免疫细胞化学的方法仅检测P16、Ki‑67基因或者仅检测MCM2、TOP2A基因的方法，检测费时费力，需要同时处理两个样本，然后进行检测获得结果，较为复杂，染色液易陈旧，而且染色效果不稳定，影响实验人员的病理阅片的准确性，不便于观察，检测的准确率低的问题。
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本实用新型公开了P16Ki67、MCM2免疫细胞化学检测试剂盒，包括盒体和无菌装置孔，所述盒体的内部设置有衬垫，所述无菌装置孔位于容器孔远离盒体边缘的一端。该P16Ki67、MCM2免疫细胞化学检测试剂盒，与现有的普通的检测试剂盒相比，本设备内部结构紧凑、携带方便、重复性好、省时省力，检测高效，稳定，能够很好的满足科学、工作的需要，在染色过程中，将两种蛋白的一抗混合后孵育样本，同时在一张样本制片上检测两种蛋白的表达，几乎加快了一倍的检测速度，提高了实验人员的病理阅片的准确性，便于观察，检测准确率提高，降低了假阳性及假阴性的可能，降低了误判的可能性，有效满足了人们的使用需求。
本发明成功开发了基于新型金纳米棒‑链霉亲和素(AuNPs‑SA)复合材料和羧基化单壁碳纳米角‑硫掺杂铂(c‑SWCNHs/S‑PtNC)的特异性超敏夹心电化学免疫传感器，用于检测人血清中的α2,6唾液酸化聚糖(α2，6‑sial‑Gs)。金纳米棒‑链霉亲和素(AuNPs‑SA)不仅能增加电极导电性，增强电子间转移，同时通过链霉亲和素和生物素系统为固载生物素标记的黑接骨木素(bio‑SNA)提供活性位点。此外，c‑SWCNHs/S‑PtNC对H2O2的还原具有优异的催化性能，并且Pt‑NH2和‑NH‑CO‑可有效捕获三氨基苯硼酸(M‑APBA)。本发明的优点在于线性范围宽。灵敏度高，特异性强，检测迅速，以及良好的可重复使用性，并且该发明可用于测量人血清中α2,6‑sial‑Gs含量，有在临床检测中有着巨大潜力。
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本发明公开了一种高灵敏的血清总胆汁酸的电化学检测方法。本发明采用的电化学方法仅需直接稀释血清即可消除基质效应，采用高灵敏的双重氧化电化学法检测原理，具有操作简便和响应快速等特点，根据电化学响应信号与待测物浓度之间的线性关系，实现血清总胆汁酸的快速、准确定量。所述检测方法测定血清总胆汁酸的线性良好，灵敏度很高，可检测рmol级的血清总胆汁酸。所述方法检测血清总胆汁酸灵敏、快速，有望用于床旁检测，有较高的科研与临床应用价值。
本发明成功开发了基于新型还原性氧化石墨烯四乙烯五胺‑硫堇‑金纳米粒子(rGO‑TEPA‑Thi‑Au)复合材料和钌钯铂三金属纳米粒子(RuPdPt TNPs)的特异性超敏夹心电化学免疫传感器，用于检测人血清中的单核细胞趋化蛋白‑1(MCP‑1)。还原性氧化石墨烯四乙烯五胺(rGO‑TEPA)含有大量氨基并显着加速电子转移，硫堇(Thi)分子增加了对带负电荷的AuCl4‑离子的吸附能力，纳米复合材料中的金纳米颗粒(AuNPs)可以提供用于固定生物材料的活性位点。此外，RuPdPt TNPs对H2O2的还原具有优异的催化性能，并且Pt‑NH2可有效捕获抗体。本发明的优点在于线性范围宽。灵敏度高，特异性强，检测迅速，以及良好的可重复使用性，并且该发明可用于测量人血清中MCP‑1含量，有在临床检测中有着巨大潜力。
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本发明涉及氯吡格雷相关代谢基因——CYP2C19*2等位基因检测的电化学传感器的制备方法及应用，属于电化学检测技术领域。其特征在于：首先合成得到c‑C60/CeO2复合材料，然后将铂纳米粒子还原在c‑C60/CeO2复合材料上，再使单链DNA信号探针与该复合材料混合，制得生物信号探针；然后通过AuNPs@Fe‑MOF，亲和素，层层自组装用于生物素化的DNA捕获探针的固定，从而制备了CYP2C19*2等位基因检测的电化学传感器，该传感器成功的用于CYP2C19*2基因发生单碱基突变的检测。本发明的优点在于灵敏度高，特异性强，检测迅速，方便。本发明为氯吡格雷相关代谢基因提供了新的检测方法及指导个体化治疗。
本发明涉及一种电化学免疫检测新型冠状病毒试剂盒的制备方法和产品及其使用方法，属于生物制品制备技术领域。本发明中当新型冠状病毒抗原与抗体特异性结合后，以聚苯胺(SPAN)和聚乙撑二氧噻吩(PEDOT)分别作为电信号物质，利用磁性Fe3O4微球和金纳米颗粒的将上述电信号放大，再通过电化学免疫方法进行检测，从而实现了高灵敏度、高特异性和实时快速新型冠状病毒的目的。其中，两种电信号物质可以任意搭配不同的新冠病毒抗原形成用于检测对应新冠病毒抗体的检测液，在实际检测中，可以根据实际需要使用其中一种检测液或将两种检测混合使用，实现对一种或两种新冠病毒抗体的检测。
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本发明公开了一种基于CdTe@MOFs/CdTeQDs复合物的电致化学发光免疫传感器的制备方法、产品、检测方法及应用，属于电化学发光传感器领域。采用一种金属有机骨架材料来固载量子点，通过利用金属有机骨架材料的特殊结构固定量子点于金属有机骨架材料内部及表面进而用此复合材料来固载第二抗体，并在纳米金功能化的二氧化钛复合物的辅助下固载第一抗体，与金属有机骨架材料/量子点/抗体共耦复合物及抗原形成双抗夹心免疫反应模式，实现了目标物识别及检测过程，极大程度地增强了电致化学发光信号。根据对不同浓度的待测物的电致化学发光信号强度的不同，实现对生化标志物的有效检测。
本发明涉及可用于预测和诊断急性冠状动脉综合征的生物标志物即可溶性CD40配体(sCD40L)检测的可再生电化学免疫传感器的制备方法，属于电化学检测技术领域。其特征在于：首先采用羧基功能化的多壁碳纳米管‑聚乙烯亚胺‑金纳米粒子纳米复合物(c‑MWCNTs‑PEI‑AuNPs)作为基底材料用于固载sCD40L抗体，实现对sCD40L的捕获，进而对sCD40L进行定量检测。由于c‑MWCNTs‑PEI‑AuNPs纳米复合物制备简单，导电性良好，具有较好的稳定性和较大的比表面积，因此能牢固地固载大量的抗体，并且利用抗体和抗原的特异性识别，使构建的电化学免疫传感器具有较强的特异性。本发明具有灵敏度高，特异性强，方便快捷和可重复多次使用的优点，并为sCD40L的检测提供了新的方法，为临床预测和诊断急性冠脉综合症提供有用的信息。
电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于：用纳米金修饰玻碳电极，然后用缓冲溶液洗涤后晾干，将猪链球菌2型抗体1滴涂于所述玻碳电极表面，4℃过夜，再将所述玻碳电极在牛血清白蛋白溶液中浸泡即得电化学免疫传感器。本发明电化学免疫传感器制备方法简单，使用方便，用于猪链球菌2型的检测方法简便易行，灵敏度高，响应时间短且检测成本低，检测结果准确、可靠，为心血管疾病的诊治创造了重要条件。
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本发明提供一种用于CLB检测的电化学免疫传感器及制备方法，该电化学免疫传感器具有基于MoS2‑AuPt纳米复合物和生物素‑链霉亲和素系统的工作电极，本发明所提出的电化学免疫传感器具有良好的灵敏度(检测限为6.86pg·mL‑1)，高特异性，可接受的重复性，同时也可用于实际猪肉样品中的检测。 1
本发明公开了一种用于液体环境中二氧化碳检测的电化学传感器及其制备方法，本发明中提出的电化学传感器包括第一传感电极与第二传感电极；所述第一传感电极包括衬底层及沉积于所述金属衬底表面的氧化物传感层，所述第一传感电极用于检测样品的pH值；所述第二传感电极包括玻碳电极以及负载于所述玻碳电极表面的全固态离子传感层，所述全固态离子传感层包括碳化钛，所述碳化钛在所述全固态离子传感层中的质量分数为20％～40％，所述第二传感电极用于检测对应pH值下的液体环境中的二氧化碳浓度。上述用于检测液体环境中二氧化碳的电化学传感器，具备时效高、抗干扰能力强、灵敏度高且检测限低的优点。
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本发明涉及可用于预测和诊断心血管病的生物标志物即前蛋白转化酶枯草溶菌素Kexin 9型(PCSK9)检测的电化学免疫传感器的制备方法及应用，属于电化学检测技术领域。其特征在于：首先通过氮掺杂石墨烯纳米带(N‑GNRs)，氨基化富勒烯‑钯铂纳米粒子(n‑C60/PdPt)复合材料，金环色葡萄球菌A蛋白(SPA)，层层自组装用于PCSK9抗体(Ab1)的固定；然后将合成得到的铂纳米粒子‑聚亚甲蓝(Pt‑PMB)与PCSK9抗体(Ab2)混合，制得纳米信标，从而制备了PCSK9蛋白检测的电化学免疫传感器，该传感器成功的用于PCSK9蛋白的检测。本发明的优点在于灵敏度高，特异性强，检测迅速，方便。本发明可为PCSK9蛋白的检测提供了新的方法，为临床预测和诊断心血管病提供有用的信息。
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本发明一种非法添加壮阳类化学成分的液-质多指标快速检测方法，其中关键在于所述对所述对照品为西地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伐地那非、伪伐地那非、他达拉非和氨基他达拉非的混合物；本发明所述非法添加的壮阳类化学成分的高效检测方法，与单一指标检测项目，检测限和专属性均无显著差异；且具有很高的检测效率。
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本发明属于电化学技术领域，具体公开了一种用于检测CEA的电化学免疫传感器及其制备与应用。本发明首次合成了rGO‑TEPA/HNMs/AuPtRu纳米复合材料，并基于rGO‑TEPA/HNMs/AuPtRu纳米复合材料构建了一种新型直接法电化学免疫传感器，用于人血清中癌胚抗原CEA的高灵敏检测。本发明将AuPtRu三金属用于修饰中空纳米金属有机骨架(HNMs)，用于信号放大，同时结合rGO‑TEPA比表面积大且具有大量氨基的优势，用作基底材料可捕获更多的蛋白质；还采用了生物素‑链霉亲和素蛋白系统，进一步实现免疫传感器信号放大。本发明所构建的电化学免疫传感器待测物与电化学信号成反比关系，具有灵敏度高(最低检测限为36.44fg·mL‑1)、重现性与稳定性好、特异性强以及检测范围宽(0.1fg·mL‑1至1μg·mL‑1)等特点。
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本发明公开了一种同时检测乳腺癌四种标志物的原位电化学免疫传感器，通过检测血清中的四种标志物HER2，ER，PR以及Ki67对乳腺癌进行分子分型，利用不同的金属离子作为检测信号，形成磁珠‑蛋白‑二氧化硅的三明治结构进行四种标志物的同时检测。该传感器是以血清为检测样品，不用抽取乳腺癌组织，操作简单，抗干扰能力强，检测结果是通过电化学工作站的电化学信号来进行分型，重复性好，准确度高，且检测限低，整个反应过程能缩短在140分钟，大大的提高了检测效率，在不同类型的癌症诊断中具有潜在的应用价值。
本发明涉及电化学免疫检测领域，特别涉及一种离子液体-石墨烯纳米复合物、其制备方法及电化学免疫检测方法。该检测方法采用双抗体夹心法，使固载在电极表面的脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子抗体（anti-APE1）与样品溶液中的脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子（APE1）发生免疫反应，再和室温离子液体-石墨烯纳米复合物与碱性磷酸酯酶（ALP）及二茂铁（Fc）标记的anti-APE1共耦合物结合。基于ALP-Fc-anti-APE与室温离子液体-石墨烯纳米复合物的电化学活性，测得循环伏安催化电流值进而检测检测样品中APE1的浓度。本发明提供的电化学免疫检测方法线性响应范围为0.1-80pg/mL，检测下限为0.04pg/mL，特异性好，灵敏度高。
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