本发明属于生物技术领域,具体公开了一种通用的糖蛋白N‑糖链释放方法包括将糖蛋白样品溶于浓氨水中,在密闭容器中55‑70℃水浴反应12‑20h,得到的反应液减压浓缩干燥,加水重新溶解,得到的N‑糖链粗品溶液调节pH至中性,然后依次经过C18固相萃取柱和石墨碳固相萃取柱的纯化,完成N‑糖链的释放和制备。该方法通用性强,与目前已有方法相比有以下优点:适用于中性N‑糖链、酸性N‑糖链和含有核心α‑1,3‑岩藻糖修饰的N‑糖链;既能用于糖链的微量分析又能用于糖链的大规模制备;操作步骤简单、快速,成本低廉,克服了传统酶法和以前报道的化学法释放糖蛋白N‑糖链的缺陷;此方法得到的还原性N‑糖即可以直接进行分析又可用于多种衍生化方法衍生化后分析。
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