本发明公开了一种调控根瘤衰老的半胱氨酸蛋白酶基因及制备方法和应用,该方法利用紫云英已知的半胱氨酸蛋白酶基因比对日本百脉根基因组序列库,在网上进行详细分析比对后以起始密码子为起点,终止密码子为终点设计特异性强的引物进行基因克隆,克隆的片段经过测序分析及比对分析,证实本发明成功的从百脉根基因组和cDNA中克隆出了调控根瘤衰老的半胱氨酸蛋白酶基因。半胱氨酸蛋白酶基因在豆科植物上中的应用,利用组织化学定位技术研究了该基因启动子的表达模式,该基因在根瘤衰老过程中的功能。结果表明,与对照植株比较,RNAi植株根瘤变大,固氮酶活增高,根瘤延迟衰老,根瘤有效固氮时间延长,植株生长更加健壮,在豆科作物上具有应用前景。
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