本发明公开了一种硫代缩酮连接单元的合成及其在DNA测序中的用途。该连接单元的结构式为:,其中R=OH或者COOH;R1=R2=甲基,或R1=苯基、对甲氧基苯基、2,4,6-三甲氧基苯基、萘基或对甲氧基萘基,R2=H,或R1、R2共同构成环己基、环戊基。该连接单元与核苷酸及荧光素连接得到的荧光素标记核苷酸可用于DNA测序。与现有技术相比,本发明合成的基于硫代缩酮结构的连接单元的可逆终止剂用于DNA测序时,其延伸效率接近100%,并且在模板为连续多个相同碱基时,一次只延伸一个可逆终止剂;同时,其合成所需原料简单易得,合成过程均为常规化学反应,可用于大规模推广使用。
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